Protocollo per NIH 3T3

cellule NIH3T3 sono ampiamente utilizzati nei laboratori di ricerca per la virologia , la cella e gli esperimenti di biologia molecolare . La linea cellulare di fibroblasti embrionali del mouse è stato sviluppato da George Todaro e Howard Green nel 1962 alla New York University . Medie

NIH3T3 cellule crescono attaccate ai piatti di plastica in un grado centigrado incubatore 37 ( 99 gradi Fahrenheit ) . Il loro terreno di crescita è Media Dulbecco Modified Eagle supplementato con 10 % siero di vitello - . Non il 10 % di siero fetale bovino che altre linee cellulari preferiscono
Propagazione

Divide NIH 3T3 ogni 2 o 3 giorni - è importante che essi non essere permesso di diventare troppo denso . Rimuovere il terreno di coltura impiegato e lavare il piatto con tampone fosfato . Incubare le cellule in tripsina per staccare le cellule e monitorare il distacco con un microscopio . Quando le cellule sono arrotondate e separate , agitare delicatamente con una pipetta . Aggiungere mezzo di crescita completo per bloccare la reazione enzimatica . Re - piastra le cellule a 300.000 cellule per 10 cm ( 3,9 pollici ) piatto .
Usi

NIH3T3 sono usati per coltivare virus della leucemia murina o una funzione come cellule immobilizzate , o strati alimentatore , che forniscono i fattori di crescita necessari per le cellule , come le cellule staminali e cheratinociti . Essi sono stati coltivati ​​su seta di ragno in esperimenti volti a scoprire biomateriali con potenziale per la rigenerazione dei tessuti .

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